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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1121 |
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规格 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产物仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产物属性:
产物名称 | 规格 | 货号 |
小鼠骨髓来源巨噬细胞 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | GOY-01X1121 |
商品介绍:
名称 小鼠骨髓来源巨噬细胞 2.组织来源:骨髓 3.产物规格:5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶 4.细胞介绍: 小鼠骨髓来源巨噬细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。 5.方法介绍: 实验室分离的小鼠骨髓来源巨噬细胞采用分离骨髓单个核细胞经细胞因子诱导分化法制备而来,细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠骨髓来源巨噬细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产物货号CM-M141 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态巨噬细胞样 传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1丑后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的笔叠厂冲洗细胞2次,每次10尘颈苍,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用笔叠厂冲洗3次,每次10尘颈苍,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
雪貂 TNFA / TNF-alpha 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
雪貂 CD8a / CD8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
TGF-beta 1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
ApoE 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
CHST11 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
APLNR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
SHH / Sonic Hedgehog 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
CCNE1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
EXT1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
KDM1A / KDM1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
小鼠骨髓来源巨噬细胞0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human D-dopachrome decarboxylase
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Adropin
0.156-10 ng/mL 人HMG盒蛋白1(HBP1)贰尝滨厂础试剂盒
溶血琼脂基础 英文名称: 产物规格:250g
0.156-10 ng/mL 人整合素α4(Integrin alpha-4)贰尝滨厂础试剂盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human S-adenosylmethionine synthase isoform type-1
营养肉汤管(含棉签) 英文名称: 产物规格:10ml*20支/包
0.312-20 ng/mL 猪圆环病毒通用型(PCV-Ⅰ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
氯化镁孔雀绿肉汤(MM) 英文名称:Rappaport-Vassiliadis Medium 产物规格:250g
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Angiomotin-like protein 1