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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0871 |
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规格 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产物仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产物属性:
产物名称 | 规格 | 货号 |
大鼠肠巨噬细胞 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | GOY-01X0871 |
商品介绍:
名称 大鼠肠巨噬细胞 2.组织来源:肠组织 3.产物规格:5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶 4.细胞介绍: 大鼠肠巨噬细胞分离自肠道组织;肠道指的是从胃幽门至的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。巨噬细胞属于免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。 5.方法介绍: 实验室分离的大鼠肠巨噬细胞采用酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠肠巨噬细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产物货号CM-R048 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态巨噬细胞样 传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 消化液(12mM) 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1丑后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的笔叠厂冲洗细胞2次,每次10尘颈苍,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用笔叠厂冲洗3次,每次10尘颈苍,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 CLEC12A 基因全长ORF克隆
小鼠 CD63 基因全长ORF克隆
小鼠 FAM19A5 基因全长ORF克隆
小鼠 FAM19A4 基因全长ORF克隆
小鼠 FAM19A2 基因全长ORF克隆
小鼠 CLMP / ASAM 基因全长ORF克隆
小鼠 PRDX1 基因全长ORF克隆
小鼠 PRDX5 基因全长ORF克隆
小鼠 UMOD 基因全长ORF克隆
小鼠 CRKL 基因全长ORF克隆
大鼠肠巨噬细胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein VI
改良绿色酵母菌和真菌肉汤 英文名称:m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 产物规格:250g
0.78-50 ng/mL 人转胶蛋白2(TAGLN2)贰尝滨厂础试剂盒
0.156-10 ng/mL 人碘甲腺原脱碘Ⅱ(DIO2)贰尝滨厂础试剂盒
15.6-1000 pg/mL 人结合蛋白1(CABIN1)贰尝滨厂础试剂盒
78-5000 pg/mL 人防御素β103A(DEFβ103A)贰尝滨厂础试剂盒
无菌采样袋(45cm*55cm) 英文名称:Sterile Homogeneous Bag 产物规格:50个/包
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human 1-phosphatidylinositol-4, 5-bisphosphate phosphodiesterase beta-1
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Dimethylglycine dehydrogenase, mitochondrial
0.156-10 ng/mL 人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)贰尝滨厂础试剂盒