021-39921927
产物介绍
外周血来源内皮祖细胞的相关*：酵母YNBA培养基 100毫升酵母SD-G培养基 100毫升10倍酵母SD-G培养基 100毫升酵母SD-GAL/RAF培养基 100毫升10倍酵母SD-GAL/RAF培养基 100毫升酵母SD-LEU/TRP培养基 100毫升
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1179 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产物仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产物属性：
产物名称 | 规格 | 货号 |
| 外周血来源内皮祖细胞 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | GOY-01X1179 |
商品介绍：
名称 外周血来源内皮祖细胞 2.组织来源：外周血 3.产物规格：5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶 4.细胞介绍： 人外周血来源内皮祖细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路，EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。 5.方法介绍： 实验室分离的人外周血来源内皮祖细胞采用采集外周血、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的人外周血来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 包被条件PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产物货号CM-H163 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态内皮细胞样 传代特性可传1-2代；不建议多次传代 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1丑后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的笔叠厂冲洗细胞2次，每次10尘颈苍，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用笔叠厂冲洗3次，每次10尘颈苍，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 Smad1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
小鼠 MAPK14 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
小鼠 Smad5 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
小鼠 CD54 / ICAM1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
小鼠 VEGF-C 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
小鼠 ALK-2 / ACVR1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
GLP1R 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
Spp1 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
MMP-12 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
小鼠 ACVR2A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
外周血来源内皮祖细胞四丁基氯化铵 离子色谱级, ≥99.0%2-啉 98%Anti-MYOG/Myogenin 肌红蛋白抗体(肌生成素)
四丁基氯化铵 97%8-羟基喹啉 AR,99.0%Anti-Nephrin 去氧素抗体
四乙基氢氧化铵 AR,25%水溶液8-羟基喹啉-5-磺酸 水合物 98%Anti-nectin 2/CD112 黏附分子CD112抗体
四乙基氢氧化铵 AR,25%甲溶液8-羟基喹啉铜 94%Anti-Nestin 巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体
叁盐酸盐 98%5-硝基-2-酚 98%Anti-Nestin 巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体（大、小鼠）
四丁基氢氧化铵溶液 ～25% in H2O (～0.8 M)8-羟基喹啉半盐 98%Anti-Neurobeachin 蛋白激锚定蛋白抗体
四丁基氢氧化铵溶液 10% in H2O1，2-环己二 99%Anti-AKAP95 蛋白激A锚定蛋白95抗体
四丁基氢氧化铵溶液 ～25% in methanol (～0.8 M)4-溴苯乙 99%Anti-NeuN 神经元核抗原抗体
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