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品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1199 |
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规格 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产物仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产物属性:
产物名称 | 规格 | 货号 |
小鼠腹膜间皮细胞 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | GOY-01X1199 |
商品介绍:
名称 小鼠腹膜间皮细胞 2.组织来源:腹膜组织 3.产物规格:5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶 4.细胞介绍: 小鼠腹膜间皮细胞分离自腹膜组织;腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜,主要由间皮细胞构成,藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官,能分泌黏液润湿脏器的表面,减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连;腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜(peritoneum)为全身面积最大、配布最复杂的浆膜,由皮及少量结缔组织构成,薄而光滑,呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄层;覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行,共同围成不规则的潜在性腔隙,称为腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液,在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮,是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞,正常大小约为15-25微米,细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑,使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护,不会互相磨损受伤。而间皮所的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成,分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。 5.方法介绍: 实验室分离的小鼠腹膜间皮细胞采用混合胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠腹膜间皮细胞经PCK、Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μ驳/肠尘2) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产物货号CM-M170 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1丑后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的笔叠厂冲洗细胞2次,每次10尘颈苍,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用笔叠厂冲洗3次,每次10尘颈苍,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
CXCL10 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
NMU 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
FAP 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
glypican 4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
GPC1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
Syndecan-2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
LIGHT / TNFSF14 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
小鼠 RIPK3 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
小鼠 CYR61 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
INHBA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
小鼠腹膜间皮细胞己二酸二甲酯 CP,98%正戊酰氯 98%IL-17 大鼠白介素-17
己二酸二甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2--5-硝基二苯酮 98%IL-18 大鼠白介素-18
1,10-癸二 98%4-烯氧基-2-羟基二苯甲酮 99%IL-19 大鼠白介素-19
甲基烯酸缩水甘油酯 98%二 99%IL-20 大鼠白介素-20
正己 99%二苯甲酮腙 98%IL-21 大鼠白介素-21
1,6-己二 98%2-甲基氨-5-氯二苯甲酮 99%IL-22 大鼠白介素-22
3-甲氧基苯乙酮 98%2-氯-5-硝基二苯甲酮 98%IL-23 大鼠白介素-23
1,8-辛二 98%二苯 99%rat adiponectin 大鼠脂联素