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小鼠腹膜间皮细胞

产物介绍

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产物厂地:上海市
更新时间:2025-02-27
厂商性质:经销商
访问量:337
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品牌其他品牌货号GOY-01X1199
规格5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶供货周期现货
主要用途产物仅供科研使用应用领域化工

冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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产物属性:   

产物名称

规格

货号

小鼠腹膜间皮细胞

5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶

GOY-01X1199

商品介绍:

名称    小鼠腹膜间皮细胞   

2.组织来源:腹膜组织

3.产物规格:5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶

4.细胞介绍:

小鼠腹膜间皮细胞分离自腹膜组织;腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜,主要由间皮细胞构成,藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官,能分泌黏液润湿脏器的表面,减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连;腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜(peritoneum)为全身面积最大、配布最复杂的浆膜,由皮及少量结缔组织构成,薄而光滑,呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄层;覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行,共同围成不规则的潜在性腔隙,称为腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液,在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮,是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞,正常大小约为15-25微米,细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑,使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护,不会互相磨损受伤。而间皮所的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成,分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。

5.方法介绍:

实验室分离的小鼠腹膜间皮细胞采用混合胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的小鼠腹膜间皮细胞PCKVimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件鼠尾胶原2-5μ驳/肠尘2

培养基含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

产物货号CM-M170

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培养条件气相:空气,95%CO25%

 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1丑后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的笔叠厂冲洗细胞2次,每次10尘颈苍,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用笔叠厂冲洗3次,每次10尘颈苍,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 CXCL10 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

 NMU 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

 FAP 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

 glypican 4 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签

 GPC1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签

 Syndecan-2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签

 LIGHT / TNFSF14 转录变体1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

小鼠 RIPK3 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

小鼠 CYR61 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

 INHBA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签

小鼠腹膜间皮细胞己二酸二甲酯 CP,98%正戊酰氯 98%IL-17  大鼠白介素-17

己二酸二甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2--5-硝基二苯酮 98%IL-18  大鼠白介素-18

1,10-癸二 98%4-烯氧基-2-羟基二苯甲酮 99%IL-19  大鼠白介素-19

甲基烯酸缩水甘油酯 98%二 99%IL-20  大鼠白介素-20

正己 99%二苯甲酮腙 98%IL-21  大鼠白介素-21

1,6-己二 98%2-甲基氨-5-氯二苯甲酮  99%IL-22  大鼠白介素-22

3-甲氧基苯乙酮 98%2-氯-5-硝基二苯甲酮  98%IL-23  大鼠白介素-23

1,8-辛二 98%二苯 99%rat adiponectin  大鼠脂联素

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