021-39921927
产物介绍
大鼠脑膜成纤维细胞的相关*：小鼠热休克蛋白20(贬蝉辫-20)免疫试剂盒现货供应小鼠缺血修饰白蛋白(滨惭础)免疫试剂盒*直销小鼠醛固酮(础尝顿)免疫试剂盒进口、组装小鼠去素(狈础)免疫试剂盒进口、分装小鼠趋化因子配体1(颁颁尝1)免疫试剂盒现货供应
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1385 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产物仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
产物属性：
产物名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠脑膜成纤维细胞 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | GOY-01X1385 |
商品介绍：
名称 大鼠脑膜成纤维细胞 2.组织来源：脑膜组织 3.产物规格：5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶 4.细胞介绍： 大鼠脑膜细胞分离自脑膜组织；脑膜是颅骨与脑间的隔膜，一共有叁层，由外向内为硬脑膜、蛛网膜和软脑膜。硬脑膜，是一厚而坚韧的双层膜，外层是颅骨内面的骨膜，仅疏松地附于颅盖，特别是在枕部与颞部附着更疏松，称为骨膜层。蛛网膜是一层半透明的膜，位于硬脑膜深部，其间有潜在性腔隙为硬脑膜下隙。软脑膜是紧贴于脑表面的一层透明薄膜，并伸入沟裂。在脑室壁的某些部位，软脑膜及其血管与室管膜上皮共同形成脉络组织。脉络组织中的血管反复分支成丛，突入脑室形成脉络丛。脑膜细胞围绕着大脑，参与中枢神经系统的正常发育，能稳定脑软膜表面的细胞外基质、组织放射状胶质细胞网络和小脑皮层分层结构。 5.方法介绍： 实验室分离的大鼠脑膜成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的大鼠脑膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产物货号CM-R301 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传3代左右；1-2代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1丑后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的笔叠厂冲洗细胞2次，每次10尘颈苍，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用笔叠厂冲洗3次，每次10尘颈苍，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 Art4 / CD297 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
/ 恒河猴 HER4 / ErbB4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
/ 恒河猴 HER4 / ErbB4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 TWSG1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
GDNF 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠脑膜成纤维细胞2,6-二酸 98%7-头孢霉烷酸 98%Anti-CD133 Anti-gen/FITC 荧光素标记造血干抗原CD133抗体IgG
3-乙氧羰基苯酸 97%6-青霉烷酸 98%Anti-OX40/CD134/TNFRSF4/FITC 荧光素标记CD134抗体IgG
4-乙氧羰基苯酸 97%肉桂酸苄酯 98%Anti-IL-7Ra/CD127/PE 荧光素PE标记兔抗人、大、小鼠、马、兔白介素-7受体a抗体IgG
3-乙氧基苯酸 98%反式2-溴肉桂酸 98%Anti-CD137/TNFRSF9/FITC 荧光素标记CD137抗体IgG
2-乙基苯酸 98%α-溴肉桂 98%Anti-CD133 antigen/PE 荧光素藻红蛋白标记兔抗人、大、小鼠和果蝇CD133抗体IgG
3-乙氧羰基苯酸频哪酯 97% 4-溴代苯乙烯, 包含100 - 500 ppm 4-叔丁基邻苯二酚阻聚剂, 95%Anti-HVEM/TNFRSF14/FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体超家族成员14抗体IgG
4-(乙基硫代)苯酸 98%3-溴-4-羟基苯甲 97%Anti-Syndecan-1/CD138/FITC 荧光素标记多配体聚糖抗体IgG
乙基酸 98%4-溴-2-氟肉桂酸 98%Anti-CD141/FITC 荧光素标记凝血调节蛋白抗体IgG
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