021-39921927
产物介绍
大鼠骨内膜间充质干细胞的相关*：真/酵母细胞线粒体分离（粗提）试剂盒 10次真/酵母细胞线粒体分离（活性）试剂盒 10次真/酵母细胞线粒体分离（高纯）试剂盒 10次同位素真/酵母细胞蛋白核酸结合凝胶迁移电泳分析试剂盒 20次生物素真/酵母细胞蛋白核酸结合凝胶迁移电泳分析试剂盒 20次可溶性真/酵母细胞膜蛋白（粗提）制备试剂盒 20次
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X1175 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 产物仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
产物属性：
产物名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠骨内膜间充质干细胞 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | GOY-01X1175 |
商品介绍：
名称 大鼠骨内膜间充质干细胞 2.组织来源：股骨、胫骨 3.产物规格：5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶 4.细胞介绍： 大鼠骨内膜间充质干细胞分离自股骨、胫骨；骨内膜是一层致密结缔组织膜，覆盖在骨的表面（关节面除外），新鲜骨内膜呈粉红色，含有丰富的血管、神经和成骨细胞。此外，附着于骨的肌腱、韧带于附着部位都与骨内膜编织在一起。因而骨内膜与骨质结合甚为牢固。骨内膜富含血管、神经，通过骨质的滋养孔分布于骨质和骨髓。骨内膜分内、外两层，外层主要是粗大的胶原纤维束，部分纤维穿入骨质，使骨内膜固定于骨面；内层疏松，含成骨细胞和破骨细胞（分别具有产生新骨质和改建骨的功能）。骨髓腔和骨松质的网眼也衬着一层菲薄的结缔组织膜，叫做骨膜。骨内膜的内层和骨膜有分化成骨细胞和破骨细胞的能力，以形成新骨质和破坏、改造已生成的骨质，所以对骨的发生、生长、修复等具有重要意义。骨内膜间充质干细胞是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化，因此可以作为组织工程中的种子细胞。骨内膜间充质干细胞的体外培养条件要求较高，在培养过程中，受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。 5.方法介绍： 实验室分离的大鼠骨内膜间充质干细胞采用冲洗骨髓、消化骨内膜、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。 6.质量检测： 实验室分离的大鼠骨内膜间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产物货号CM-R161 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右；3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1丑后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的笔叠厂冲洗细胞2次，每次10尘颈苍，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用笔叠厂冲洗3次，每次10尘颈苍，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
MTOR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
MTOR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
MTOR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
TrkA / NTRK1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签
TGF-beta 1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
CCL20 转录变体2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
HGF 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
TNFSF10 / TRAIL 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全长ORF克隆 (表达载体, 密码子优化), 无标签
甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全长ORF克隆 (表达载体, 密码子优化), 无标签
大鼠骨内膜间充质干细胞肉桂 分析标准品，>99.5%（GC)香叶 98%Anti-CYP2C19 色素P450 2C19抗体
肉桂酸 ≥99.0%, FG香叶 97%Anti-CYP450 色素P450单氧化抗体
肉桂酸 天然, ≥99%, FCC香叶 Standard for GC, ≥99.0% (GC)Anti-Cyr61/IGFBP10/CCN1 富半胱肝素结合蛋白61抗体
香茅 85%,FCC乙酸香叶酯 96%Anti-CYP2E1 抗色素P450ⅡE1抗体
香茅 96%乙酸香叶酯 90%，天然, FCC, Kosher Anti-Cytochrome C 色素 C抗体
肉桂 98%香叶基酮 97%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) 化Disabled 1抗体
肉桂 分析标准品，>99%（GC)甲酸香叶酯 85%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) 化Disabled 1抗体
正癸 Standard for GC,≥99.5% (GC)甲酸香叶酯 85%,FCC, KosherAnti-Phospho-Dab1 (Ser491) 化Disabled 1抗体
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