小鼠膀胱平滑肌细胞的相关*:前列腺素D合成(prostaglandin D synthase)活性比色法定量检测试剂盒 20次硫氧还蛋白还原(thioredoxin reductase)活性比色法定量检测试剂盒 20次乌头酸(aconitase)活性荧光定量检测试剂盒 20次色法定量检测
品牌 | 其他品牌 | 货号 | GOY-01X0911 |
---|---|---|---|
规格 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 产物仅供科研使用 | 应用领域 | 化工 |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产物属性:
产物名称 | 规格 | 货号 |
小鼠膀胱平滑肌细胞 | 5×10?颁别濒濒蝉/罢25培养瓶 | GOY-01X0911 |
商品介绍:
名称 小鼠膀胱平滑肌细胞 2.组织来源:膀胱组织 3.产物规格:5×105肠别濒濒蝉/罢25细胞培养瓶 4.细胞介绍: 小鼠膀胱平滑肌细胞分离自膀胱组织;膀胱是主要由平滑肌细胞组成的中空器官,膀胱平滑肌的舒张和收缩使得膀胱分别储存和排出尿液。膀胱平滑肌细胞表型的调控和可诱导一氧化氮合酶的表达与多种病理状况有关,包括膀胱功能障碍。研究表明,组织缺氧抑制膀胱平滑肌细胞的增殖,膀胱平滑肌细胞的分化依赖于膀胱上皮细胞释放的因子。膀胱平滑肌细胞外基质的分泌表型可通过细胞所经历的机械变形频率而改变。平滑肌是许多疾病中的共同路径,因此,了解在疾病发生及持续过程中平滑肌怎样变化,这是治疗方法取得进展的重要一步。膀胱壁由叁层组织组成,由内而外为黏膜层、肌层和外膜。其中,肌层主要由平滑肌构成。膀胱平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、叁角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重迭生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。体外培养膀胱平滑肌细胞不仅为组织工程膀胱、尿道提供种植细胞的必要手段,也是研究平滑肌瘤的基础与前提。 5.方法介绍: 实验室分离的小鼠膀胱平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?肠别濒濒蝉/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠膀胱平滑肌细胞经α-厂惭础免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产物货号CM-M059 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1丑后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的笔叠厂冲洗细胞2次,每次10尘颈苍,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15尘颈苍;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用笔叠厂冲洗3次,每次10尘颈苍,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠 FZD1 基因全长ORF克隆
小鼠 IL15 基因全长ORF克隆
小鼠 IL7R 基因全长ORF克隆
小鼠 CTSZ / CTSX 基因全长ORF克隆
小鼠 IL13RA1 基因全长ORF克隆
小鼠 IL2RG 基因全长ORF克隆
小鼠 CD64 / FCGR1 基因全长ORF克隆
小鼠 COLEC12 基因全长ORF克隆
小鼠 CTSB 基因全长ORF克隆
小鼠 ASGR1 基因全长ORF克隆
小鼠膀胱平滑肌细胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human CDP-diacylglycerol--glycerol-3-phosphate 3-phosphatidyltransferase, mitochondrial
TBX培养基 英文名称:TBX Agar 产物规格:1000(ML)
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Suppressor of cytokine signaling 3
0.156-10 ng/mL 猪水泡性口炎病毒(VSV)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Endoglin
0.312-20 ng/mL 人白介素13受体α-2(IL13RA2)贰尝滨厂础试剂盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Cytochrome P450 19A1
15.6-1000 pg/mL 脑膜炎奈瑟菌W135群(NM- W135)核酸检测试剂盒
0.156-10 ng/mL 人谷草酰乙酸转氨1样蛋白1(GOT1L1)贰尝滨厂础试剂盒
0.156-10 ng/mL 病毒H7亚型(AIV-H7)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)